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小鼠膀胱癌細胞MB49科研說明書
細胞特性
1) 來源:小鼠膀胱癌
2) 形態:上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌(jun)、酵母和真菌(jun)檢測為陰性(xing)
運輸和保(bao)存
可選擇干冰運(yun)輸(shu)及發送(song)復蘇(su)存活細胞方(fang)式:
(1)干冰(bing)運輸,收到后立即轉(zhuan)入液氮或者-80度冰(bing)箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到(dao)后(hou)應繼續生長,傳代達到(dao)細胞生長狀態良好時,再進行(xing)凍存。具體(ti)操作見細胞培養步驟。
細胞培養詳細步驟
收到常溫細胞后處理方法
1. 收到細(xi)胞后首先觀察細(xi)胞瓶是(shi)否完好(hao),培(pei)養液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現象,若有上(shang)述現象發(fa)生請及時和我(wo)們聯系。
2. 用75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞瓶(ping)表面,顯微鏡下觀察細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運輸問題貼壁細(xi)胞會有(you)少(shao)量從(cong)瓶(ping)壁脫落,先(xian)不要打(da)開培(pei)養(yang)瓶蓋(gai),將(jiang)細(xi)胞置(zhi)于細(xi)胞培(pei)養(yang)箱內靜置(zhi)培(pei)養(yang)2-4小時,以便穩定(ding)細(xi)胞狀態(tai).
3. 仔細閱讀細胞說明書,了(le)解(jie)細胞相(xiang)關信(xin)息,貼壁特性(貼壁(bi)/懸浮),細(xi)胞形態,所用基礎培養(yang)基.血清比例(li)(li),所需(xu)細(xi)胞因子,傳代(dai)比例(li)(li),換液頻率等.
4. 靜置完(wan)成后(hou)(hou),取出(chu)細(xi)胞(bao)培養瓶,鏡檢,拍照,記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)(tai)(所拍照片將作為(wei)后(hou)(hou)續服務(wu)依據)建議細(xi)胞(bao)傳代培養后(hou)(hou),定期拍照,記(ji)錄細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)(tai).
5. 貼壁細:若(ruo)細胞生長密(mi)(mi)度超(chao)過(guo)80%,可正常傳代,若(ruo)未超(chao)過(guo)80%,移除細胞培養瓶(ping)內培養基(ji),預留5ML左右繼(ji)續培養,直至細胞密(mi)(mi)度達80%左右再進(jin)行傳代操作,瓶(ping)蓋可稍微(wei)擰(ning)松.
6. 懸浮細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao):將(jiang)(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)內(nei)(nei)液(ye)體全部轉移(yi)至(zhi)50ML無菌(jun)離心(xin)管(guan)內(nei)(nei),1200rpm離心(xin)5min,離心(xin)后上清(qing)培(pei)(pei)養(yang)基可(ke)收集備用,管(guan)底細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)沉淀(dian)加入5ml培(pei)(pei)養(yang)基吹打.重懸.鏡檢時,基細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)密度超過(guo)(guo)80%,可(ke)將(jiang)(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液(ye)分至(zhi)2個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)內(nei)(nei)培(pei)(pei)養(yang),補加培(pei)(pei)養(yang)基至(zhi)5ml;若細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)密度未超過(guo)(guo)80%,將(jiang)(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液(ye)移(yi)至(zhi)原瓶(ping)繼續(xu)培(pei)(pei)養(yang),直(zhi)至(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)密度達80%左右時再進行傳代操作.
方 式: 詳詢經理
小鼠膀胱癌細胞MB49科研說明書
內靜(jing)置培養(yang)過(guo)夜,隔(ge)天(tian)再取出(chu)觀察(cha)。此(ci)時多數(shu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)均會貼壁(bi),若細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)仍不能貼壁(bi)請用(yong)臺盼藍染色(se)測定細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活(huo)力,如果證實細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活(huo)力正常,請將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)離心后用(yong)新鮮培養(yang)基再次(ci)貼壁(bi)培養(yang);如果染色(se)結果顯示細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)無(wu)活(huo)力,請拍下照片及時和我(wo)們(men),信息確(que)認后我(wo)們(men)為您再免(mian)費寄(ji)送一次(ci)。
4. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條(tiao)件的(de)培養(yang)(yang)(yang)基用(yong)于細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)(yang)。培養(yang)(yang)(yang)瓶內多余的(de)培養(yang)(yang)(yang)基可(ke)(ke)收集(ji)備用(yong),細(xi)(xi)胞(bao)傳代時可(ke)(ke)以一定(ding)比(bi)例和客(ke)戶自備的(de)培養(yang)(yang)(yang)基混合,使細(xi)(xi)胞(bao)逐漸適應培養(yang)(yang)(yang)條(tiao)件;建議直接(jie)購買提供(gong)的(de)*培養(yang)(yang)(yang)基。
5. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞(bao)后前3天各(ge)拍幾張細胞(bao)照片(pian),記錄細胞(bao)狀態(tai),便于(yu)和技術部(bu)溝通交流。
培(pei)養溫馨提示:
1)公(gong)司努力實現為(wei)科學研究提供實驗細(xi)胞技術(shu)服務。所提供的實驗細(xi)胞及其子代,不(bu)能用于人體實驗和臨(lin)床診斷、治(zhi)療(liao)。
2)公(gong)司細(xi)胞資源中(zhong)心(xin)(xin)承諾(nuo)盡zui大努(nu)力(li)對(dui)實驗細(xi)胞資源相關信息(xi)進行及時更新(xin)。但限于我們的技術條(tiao)件,中(zhong)心(xin)(xin)不保證其準確性(xing)。
3)從文獻(xian)等處引用的(de)信息本(ben)中心未進行核實,僅供參考(kao)。
注意事項:
1. 收到細(xi)胞后,若發(fa)現干冰已揮(hui)發(fa)干凈、凍(dong)存管瓶蓋(gai)脫落、破損及細(xi)胞有污(wu)染,請(qing)立即(ji)與我們聯系。
2. 所有動(dong)物(wu)(wu)細胞均視為有潛在的(de)生物(wu)(wu)危害性(xing),必須在二級生物(wu)(wu)安全臺內操(cao)作,并請注意防(fang)護,所有廢液及(ji)接觸過此細胞的(de)器皿需(xu)要滅菌后方能丟棄。
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