慢病毒(du)包(bao)裝簡要程序：
以六(liu)孔板(ban)中的1孔為例，每(mei)個樣品需要1×10∧6個293FT細胞。
1、取1.5ml滅菌(jun)EP管，加(jia)入(ru)1.5μg包裝(zhuang)混(hun)合(he)質粒(li)和(he)0.5μg表(biao)達(da)質粒(li)以及250μl的(de)無血清Opti MEM。輕柔混(hun)勻(yun)，室溫(wen)孵育5min。
2、取(qu)1.5ml滅菌EP管，取(qu)9μl 脂質(zhi)體2000l溶于250μl無血清Opti-MEM I培(pei)養基中。輕柔混勻，室(shi)溫孵育5min。
3、將(jiang)DNA溶液(ye)和脂質體(ti)溶液(ye)輕柔混勻(yun)。室溫(wen)孵育20min
4、用胰酶消化(hua)并(bing)記(ji)數293FT細胞。用含(han)血清的(de)DMEM培養(yang)基重懸細胞。
5、在六(liu)孔(kong)板中每孔(kong)，加入(ru)1ml含血清的生長(chang)培養基，再加入(ru)DNA-脂質體復合物。
6、將1ml重懸的293FT細胞（1×10∧6個細胞/ml）加入到平板中(zhong)。37℃CO2孵箱中(zhong)孵育過夜。
7、移除(chu)含有DNA-脂(zhi)質(zhi)體復合物的培養基(ji)移除(chu)，代之以DMEM（含丙酮酸鈉(na)和非必須氨基(ji)酸）。
7、轉染后48-72h收獲含(han)病毒的(de)上清。3000 rpm 離(li)心20min，去除沉淀。
8、病毒上清-80°C貯存。
包裝(zhuang)出來的(de)慢(man)病毒對(dui)NIH/3T3細(xi)胞達90%以(yi)上感染效(xiao)率(lv)