小鼠(shu)ELISA試劑盒--小鼠信號轉導子和轉錄激活子1（STAT1）ELISA試劑盒是經我司專業的技術人員檢定并得到國內各大高校實驗團隊，課題組認可的科研用ELISA試劑盒，該產品靈敏度高，特意性強，檢測測定樣本的結果穩定準確，做科研實驗找我們就對了。
小鼠ELISA試劑盒的(de)操作方(fang)法：
雙抗體(ti)夾心法：
1.包被(bei)：用(yong)0.05MPH9.牰碳(tan)酸鹽包被(bei)緩(huan)沖液(ye)將抗(kang)體稀釋(shi)至蛋白質(zhi)含量為(wei)1～10μg/ml。在每(mei)(mei)個聚苯乙烯板的反應(ying)孔(kong)中(zhong)加0.1ml，4℃過夜。次(ci)日，棄去孔(kong)內溶液(ye)，用(yong)洗滌緩(huan)沖液(ye)洗3次(ci)，每(mei)(mei)次(ci)3分鐘(zhong)。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣(yang)：加一定(ding)稀釋(shi)的待(dai)檢樣(yang)品0.1ml于上述已包(bao)被之反(fan)應孔中，置(zhi)37℃孵(fu)育(yu)1小時。然后洗滌(di)。（同(tong)時做空白孔，陰(yin)性對(dui)照(zhao)孔及陽(yang)性對(dui)照(zhao)孔）。
3. 加酶(mei)標(biao)抗(kang)體：于各反(fan)應孔中(zhong)，加入新鮮(xian)稀釋的酶(mei)標(biao)抗(kang)體（經滴定后(hou)的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shi)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于(yu)各(ge)反(fan)應孔中加入臨時(shi)配(pei)制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘(zhong)。
; 5. 終止反應：于各反應孔中加(jia)入(ru)2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定(ding)：可于白色(se)背(bei)景上，直接(jie)用肉眼(yan)觀(guan)察結果：反應孔(kong)內顏(yan)色(se)越(yue)深(shen)，陽性程(cheng)度(du)越(yue)強，陰性反應為無色(se)或極淺(qian)，依據所(suo)呈顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺(qian)，以(yi)“+”、“-”號表示。也(ye)可測(ce)OD值：在(zai)ELISA檢測(ce)儀上，于450nm（若(ruo)以(yi)ABTS顯色(se)，則410nm）處，以(yi)空白對照(zhao)(zhao)孔(kong)調零(ling)后測(ce)各(ge)孔(kong)OD值，若(ruo)大于規定(ding)的(de)陰性對照(zhao)(zhao)OD值的(de)2.1倍，即(ji)為陽性。
間接法：
1.用包被緩沖液將已知(zhi)抗(kang)原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；
2.次(ci)日洗滌3次(ci)；
3.加一定稀釋的(de)待(dai)檢樣品（未知(zhi)抗體(ti)）0.1ml于上述(shu)已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；
4.（同時(shi)做(zuo)空白(bai)、陰性(xing)及(ji)陽性(xing)孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分(fen)鐘，洗滌；
6.’最后一遍用(yong)DDW洗滌。
其(qi)余步(bu)驟同“雙抗(kang)體(ti)夾心法”的4、5、6。
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